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1521年12月,在里斯本爆发黑死病疫情之际,曼努埃尔一世和他的朝廷仍然留在里贝拉宫(Ribeira Palace)。
12月4日,曼努埃尔开始出现高烧的症状,到11日时已完全无力。
1521年12月13日,他去世,享年52岁。
他的继任者是他的儿子葡萄牙的约翰三世(John III of Portugal)。
次日,他的遗体被装在黑色天鹅绒覆盖的棺材中,运往里斯本的贝伦区(Belém),后面跟随着大量哀悼者。
他暂时被埋葬在雷斯特洛教堂(Restelo Church),而阿维斯王朝(House of Aviz)的皇家墓室则设在热罗尼莫斯修道院(Jerónimos Monastery)内。
葬礼由王国中最显赫的四位贵族主持,分别是布拉干萨公爵(Duke of Braganza)、科英布拉公爵(Duke of Coimbra)和维拉雷尔侯爵(Marquis of Vila Real),仅有皇室家族和葡萄牙贵族参加,仪式为私人性质。
其遗骸于1551年转移至热罗尼莫斯修道院,与他的第二任妻子阿拉贡的玛丽亚(Maria of Aragon)一同安葬。
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