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伊莎贝拉的统治开局并不顺利。
亨利四世曾指定伊莎贝拉为继承人，所以当她在1474年登上王位时，已有数个针对她的阴谋。
迭戈·帕切科，比利亚纳侯爵，以及他的追随者们主张亨利的女儿乔安娜·贝尔特拉内哈（Joanna la Beltraneja）才是合法的女王。
不久之后，侯爵提出了他的主张，托莱多大主教——他的曾祖父且曾长期支持伊莎贝拉——离开了朝廷并与他合谋。
他们计划让乔安娜与她的叔叔，葡萄牙国王阿方索五世结婚，并入侵卡斯蒂利亚以夺取王位。
1475年5月，阿方索国王带领他的军队进入西班牙并推进到普拉森西亚。
在那里，他娶了年轻的乔安娜。
接着，一场关于卡斯蒂利亚继承权的漫长而血腥的战争爆发。
这场战争来回持续了将近一年，直到1476年3月1日的托罗战役（Battle of Toro），在这场战役中，双方都宣称自己获胜并进行庆祝。
